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细胞系开发流程实验室一抗选择要点参考

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avatar 发表于 2024-5-10 15:02:20 | 显示全部楼层 |阅读模式
  细胞系开发流程实验室科研工作离不开抗体,WB、IP、IHC、IF、ChIP和FC都需要用到抗体,那科研实验室如何选择合适的抗体呢?在选择一抗时,我们需要注意多个要点以确保实验的准确性和可靠性。一抗选择要点:
  1、确定抗体的名字。注意中英文名字、它名、亚型等信息。
  2、确定你的实验类型。Elisa,WB,IHC,ICC,还是FACS。一般抗体的说明书都会列出该抗体经验证过适用于何种实验的类型,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种实验验证,请根据说明书列出的已验证的类型来选择适合你实验的抗体。
  3、确定实验样本的种属。Human,Mouse,还是Rat。一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种物种实验,请根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验的抗体。
  4、样本蛋白的结构性质。了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性,蛋白空间构象的改变,会影响抗体的免疫亲和反应。
  5、单多克隆抗体的选择。市面上的抗体还是以多克隆抗体为主,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对就低;而多克隆抗体特异性稍弱,但抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等避免)。
  除了以上要点,一抗的来源和种属反应性也需要考虑。不同来源的一抗可能具有不同的特异性和亲和力,因此我们需要根据实验需求选择合适的来源。同时,种属反应性决定了一抗是否能够与不同种属的抗原发生反应。在选择一抗时,我们需要确保它能够与实验中所使用的抗原发生特异性反应。
  综上所述,在选择一抗时,我们需要综合考虑特异性、亲和力、纯度、来源和种属反应性等多个要点。通过仔细评估和比较不同的一抗产品,我们可以选择出最适合实验需求的一抗,从而提高实验的准确性和可靠性。

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