病毒CDMOPCR扩增原理及步骤

　　病毒CDMOPCR(聚合酶链式反应）是一种用于放大扩增特定的DN**段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。
　　PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。
　　1、基本要素和扩增原理
　　基本要素与DNA复制的基本要素是一致的。待拷贝的 DNA 称为模板，它可以是双链 DNA 也可是单链DNA，最后扩增得到的产物是双链状态的。引物是 DNA 复制的先锋，就象结晶过程中的晶核，引导 DNA 的合成。在 PCR 扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。DNA 聚合酶是 DNA 复制的动力，在 dNTP 等底物存在时在引物的引导下沿着模板 DNA 合成互补的 DNA 链。
　　2 、PCR 扩增的步骤
　　首先将模板 DNA 置于 92℃ -96℃，进行变性（denaturation）处理，使 dsDNA 在高温下解链成为 ssDNA ，且热变性不改变其化学性质；
　　然后退火（annealing） ，将温度降至 37℃ -72℃，使引物与模板的互补区相结合；
　　最后，在 72℃ 条件下， DNA 聚合酶将 dNTP 连续加到引物的 3'-OH 端，合成 DNA ，这个步骤称为延伸（extension）。这三个热反应过程的重复称为一个循环，经过 20-40 个循环可扩增得到大量位于两条引物之间序列的 DNA 片段。